核酸知识点总结 第1篇
基本组成单位—核苷酸核苷酸由一分子五碳糖、一分子磷酸、一分子含氮碱基组成)
(1)DNA的基本单位脱氧核糖核苷酸
(2)RNA的基本单位核糖核苷酸
核酸中的相关计算:
(1)若是在含有DNA和RNA的生物体中,则碱基种类为5种;核苷酸种类为8种。
(2)DNA的碱基种类为4种;脱氧核糖核苷酸种类为4种。
(3)RNA的碱基种类为4种;核糖核苷酸种类为4种。
化学元素组成:C、H、O、N、P
核酸知识点总结 第2篇
1.核酸分子的强烈的紫外线吸收:嘌呤和嘧啶都有共轭双键,最大的吸收波长在260nm.
分子的变性:理化性质作用下,氢键断裂,使得双链变成单链。共轭双键暴露,使得紫外线吸收的作用增强,叫做增色效应。
复性:两条链重新配对,恢复以前的双链结构。产生减色效应。
4.核酸分子杂交:不同的RNA或者DNA单链只要碱基可以互补就可以形成双链,称为核算分子的杂交。
核酸知识点总结 第3篇
1.动物细胞融合技术
(1)是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。
(2)原理:细胞膜的流动性
(3)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。
(4)动物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。制备单克隆抗体(最重要的用途)
2.单克隆抗体及其应用
(1)抗体:一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核。
(2)单克隆抗体的制备过程:
两次筛选:第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
①第一次筛选:将未融合的 B-淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及
BB 融合、瘤瘤融合等的细胞通过选择培养基淘汰,筛选出 B-瘤融合的细胞。
②第二次筛选:将产生特定抗体的 B-瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。
(3)获取单克隆抗体的场所
①若在培养基中进行杂交瘤细胞培养,则从培养液中提取。
②若在小鼠或其他动物腹腔中培养,则从腹水中提取。
(4)杂交瘤细胞的特点:既能大量繁殖,又能产生专一的抗体。
(5)单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。
(6)在腹腔内增殖的优点:不需要特定的培养基,不需要严格的外界条件。
(7)筛选的时候用:特定的选择性培养基进行筛选。
(8)单克隆抗体的作用:
① 作为诊断试剂:准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟一定抗原发生特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点。
② 用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗癌症治疗,可制成“生物导弹”(借助单克隆抗体的导向作用),也有少量用于治疗其它疾病。
三.动物体细胞核移植技术和克隆动物
1,动物体细胞核移植技术
(1)概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个胚胎最终发育为动物个体的技术。
(2)哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植(比较容易)和体细胞核移植(比较难)。
(3)选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞比较大,容易操作;卵(母)细胞细胞质多,营养丰富。卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达。
(3)体细胞核移植的大致过程是:(右图)
①伴随着两细胞融合,体现细胞膜的结构特点——具有一定的流动性。
②该技术形成的重组细胞发育成一个新个体,体现了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。
(4)体细胞核移植技术的应用:
①加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育;
②保护濒危物种,增大存活数量;
③生产珍贵的医用蛋白;
④作为异种移植的供体;
⑤用于组织器官的移植等。
(5)体细胞核移植技术存在的问题:克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。
胚胎工程
1胚胎工程:是指对生殖细胞,受精卵或早期胚胎细胞所进行的多种 显微操作 和处理,然后获得的胚胎移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类的各种需求。胚胎工程技术技术包括体外受精、 胚胎移植、胚胎分割等技术。
2受精:精子和卵子结合成合子(受精卵)的过程。包括受精前的准备阶段和受精阶段,哺乳动物受精在输卵管内完成。
3准备阶段1——精子获能
(1)精子的准备:刚刚排出的精子,不能立即与卵子受精,必须在雌性动物生殖道 发生相应的生理变化后,才能获得受精能力精子的外形:哺乳动物成熟的精子外形似蝌蚪,分 头 、 颈 和 尾 三大部分。不同种动物精子的形态相似,大小略有不同,与动物的体型大小 无关
(2)准备阶段2:卵子的准备:动物排出的卵子成熟程度不同,有的可能是初级卵母细胞(马、犬),有的可能是 次级卵母细胞(猪xxx) ,但它们都要在 输卵管 内进一步成熟,当达到 MII中期 时,才具备与精子受精的能力。
4受精阶段:哺乳动物的受精过程主要包括:精子穿越透明带 ,进入 卵细胞膜 ,雌雄原核形成和融合,卵裂期开始。
早期胚胎发育过程:受精卵 卵裂期 桑椹胚 囊胚 原肠胚 胎儿形成
卵裂期:细胞在输卵管内中进行有丝分裂,数量增加,胚胎总体积并不增加或略有减小
桑椹胚:这个阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能,属于 全能 细胞
囊胚:包括内细胞团和 滋养层细胞,有囊胚腔。囊胚从透明带中伸展出来称为孵化。
原肠胚:内细胞团表层的细胞形成外胚层,下方的细胞形成内胚层。这时的胚胎称为原肠胚,
由内胚层包围的囊腔叫原肠腔 。滋养层则发育为胎儿的胎膜和胎盘。
二 胚胎工程技术及其应用
——体外受精:试管动物技术是指人工操作使卵子和精子在 体外条件下成熟和受精 。
——胚胎移植:是指将体外受精获得的早期胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。
3.基本程序:
(1)供、受体的选择和处理(使用激素进行同期发情处理、(促性腺激素)超数排卵处理)
(2)配种或人工受精
(3)胚胎收集(冲卵(早期胚胎))、
(4)检查(胚胎发育到桑椹胚或囊胚)
(5)胚胎移植:手术法(引出子宫和卵巢将其注入);非手术法(用移植管将其送入子宫)
5)移植后的检查(是否妊娠)
4,意义:可充分发挥雌性优良个体繁殖潜力。供体主要职能只是产生优良特性的胚胎,缩短繁殖周期。
——胚胎分割:采用机械方法将早期胚胎切割成2、4或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术。
2.仪器设备:体视显微镜和显微操作仪
3.意义:来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质,属于无性繁殖。
4.操作程序:
(1)选择发育良好、形态正常的囊胚,移入盛有操作液的培养皿
(2)用分割针或分割刀切开胚胎,吸出半个,注入空透明带或直接将裸半xxx给受体。分割囊胚时要将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此时还可用分割针分割滋养层,做胚胎DNA分析性别鉴定。
5.局限:刚出生的动物体重偏低,毛色和斑纹上存在差异,同卵多胎的可能性有限。
第三章 基因工程
第一节 重组DNA技术的基本工具
一,基因工程:基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。
操作水平:DNA分子水平
原理:基因重组
优点:1.突破物种界限 2.定向改造生物的遗传特性
(一)基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”——限制性内切核酸酶(限制酶)